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廖云珍 葉曉光 于憲 2005-12-13 13:50:25 中華實用醫(yī)藥雜志 2003年3月第3卷第6期
【摘要】 目的 了解血清乙肝病毒表面抗原和抗體（HBsAg和抗HBs）同時陽性的特征。方法 采用微粒子酶免疫分析技術(shù)測定3502例HBsAg陽性病例的血清HBsAg、抗HBs、乙肝病毒e抗原及其e抗體（HBeAg、抗HBe），并分析相關(guān)乙肝病毒（HBV）血清標(biāo)志物模式。結(jié)果3502例HBsAg陽性血清中，有92例（2.63%）HBsAg和抗HBs同時陽性。這92例中HBeAg陽性占52.17%（48/92），抗HBe陽性占42.39%（39/92）。抗HBs和HBsAg同時陽性可發(fā)生于HBV感染的不同臨床類型患者的血清中。結(jié)論 HBsAg陽性者即使有抗HBs的存在，也需要密切觀察。
關(guān)鍵詞 乙肝表面抗原 乙肝表面抗體 免疫酶技術(shù)
乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物顯示模式及其檢測是目前臨床分析和判斷乙肝患者病情、傳染性大小和療效分析的主要依據(jù)之一，我們嘗試應(yīng)用靈敏度和準(zhǔn)確度較高的ABˉBOTT檢測系統(tǒng)定量檢測HBV血清標(biāo)志物，以尋找其中的規(guī)律，為臨床處理乙型病毒性肝炎提供較為準(zhǔn)確的依據(jù)。我們在檢測3502例HBV感染者中發(fā)現(xiàn)有多種不同的血清學(xué)標(biāo)志模式，其中發(fā)現(xiàn)92例HBsAg與抗HBs同時陽性特殊血清學(xué)模式，現(xiàn)就此進(jìn)行分析。
1 資料與方法
1.1 病例選擇對自2001年2月～2002年11月我科門診及住院乙肝患者的血清樣本共3502例，在檢出HBsAg陽性的同時檢測抗HBs，共檢出HBsAg/抗HBs同時陽性者92例，其中男51例，女41例，年齡5～72歲。其中13例為住院患者，均有反復(fù)肝功能異常病史。除3例尚有HDsAg陽性外，其余患者甲、丙、丁、戊、庚型標(biāo)志均陰性，并已排除酒精性、藥物性、中毒性肝炎及脂肪肝。診斷符合2000年西安第十次全國病毒性肝炎學(xué)術(shù)會議修訂的病毒性肝炎的診斷分型標(biāo)準(zhǔn)。
1.2 實驗方法
1.2.1 標(biāo)本收集 抽晨空腹靜脈血3ml，分離血清后于當(dāng)天進(jìn)行HBV血清學(xué)檢測。
1.2.2 HBV血清標(biāo)志物的檢測 采用美國Abbott公司生產(chǎn)的AxSyM全自動免疫熒光分析儀及配套Abbott試劑，檢測HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe四個項目，均采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）檢測，操作及質(zhì)控均按試劑藥盒操作說明規(guī)范進(jìn)行。HBV-DNA檢測應(yīng)用熒光定量PCR法，>1.0E3copy/ml為陽性。
2 結(jié)果
3502例在檢出HBsAg陽性的同時檢測抗HBs，有92例（2.63%）在同一份血清樣本中抗HBs和HBsAg同時陽性，HBsAg和抗HBs同時陽性的血清學(xué)模式有3種，見表1。其中12例患者在不同時間采血均獲相同的模式（即一個患者多次均檢出HBsAg和抗HBs同時陽性）。
表1 92例HBsAg和抗HBs同時陽性的血清學(xué)模式 （略）
92例中有住院患者13例，男12例，女1例，患乙型肝炎的病程1～26年，乙型病毒性肝炎慢性輕度4例，慢性中度2例，慢性中度重疊丁型肝炎病毒感染3例，乙肝后肝硬化肝功能失代償期2例，肝硬化惡變2例，均伴有不同程度的肝功能異常。
92例中有9例進(jìn)行HBV-DNA（PCR）檢測，發(fā)現(xiàn)有5例HBV-DNA呈陽性。
92例中有6例為全程乙肝疫苗接種者。
3 討論
傳統(tǒng)觀點認(rèn)為，HBV感染后抗HBs的出現(xiàn)是HBV被宿主清除的保護(hù)性標(biāo)志，此時的血清沒有傳染性，換言之，HBV現(xiàn)行感染與抗HBs是相互排斥的。但近年的文獻(xiàn)報道抗HBs可以單獨 ［1，2］和（或）HBsAg同時 ［3］ 存在于HBV感染相關(guān)的慢性肝病患者血清中，這些患者體內(nèi)可以有HBV存在和復(fù)制。本組檢測結(jié)果表明，HBsAg陽性的3502病例中，2.63%同時用微粒子免疫熒光分析技術(shù)試驗可測得抗HBs陽性，這一百分比主要取決于抗HBs試驗的靈敏度和特異性，因為部分抗HBs處于臨界值，可能部分抗HBs反應(yīng)是非特異性的，或者可能是HBsAg-抗HBs動態(tài)平衡階段（在HBV-M模式的轉(zhuǎn)換過程中）。然而，有些病例在不同時期采血重復(fù)此試驗仍能測得陽性，且抗HBs水平也較高，提示抗HBs確實與HBsAg同時存在。研究證實［4］ 同時出現(xiàn)HBsAg/抗HBs陽性者，HBsAg和抗HBs的亞型不同，為同時或相繼被不同的HBV亞型感染。此時，抗HBs僅能中和同型血清中的病毒。本研究中，少部分慢乙肝患者在病程的前幾年為HBsAg陽性，近幾年出現(xiàn)HBsAg/抗HBs同時陽性，這種現(xiàn)象的發(fā)生可能由于HBV具有高度變異性，前S/S區(qū)基因發(fā)生變異，引起HBsAg“a”決定簇的抗原性免疫原性發(fā)生改變，使野毒株產(chǎn)生的抗HBs與變異的HBsAg的結(jié)合力下降。從而導(dǎo)致兩者共存。Wang等 ［5］ 發(fā)現(xiàn)，HBˉsAg/抗HBs共存時有前S/S基因多個點突變和少量缺失，尤其是“a”決定簇變異導(dǎo)致野毒株第126位異亮氨酸變?yōu)樘扉T冬酰胺。本組資料中部分病例為HBV慢性感染者，同時存在HBsAg和抗HBs，甚至是高度感染，因為49/92例被測得HBeAg陽性，說明肝細(xì)胞中的病毒復(fù)制仍可持續(xù)，因此，抗HBs的出現(xiàn)并不能標(biāo)志HBV復(fù)制的停止。有9例測HBV-DNA（定量PCR法），其中5例呈陽性，也進(jìn)一步說明HBV復(fù)制活躍。
本組資料中，6例HBsAg/抗HBs同時陽性者發(fā)生于接種乙型肝炎疫苗后，他們在接種乙肝疫苗前用酶聯(lián)免疫法檢測僅抗HBc是陽性的，全程免疫接種后HBsAg/抗HBs同時陽性，考慮該部分人既往有HBV感染或血清HBsAg低水平存在，普通檢測手段不能測出，接種疫苗后，在宿主免疫壓力下，發(fā)生變異株感染。Lee等 ［6］ 報道了接種乙型肝炎疫苗后出現(xiàn)HBsAg肽G145R的逃逸變異。
從本文13例住院病人中可見血清HBsAg/抗HBs同時陽性可發(fā)生于慢性HBV感染的不同臨床類型的病例中，基因變異與病情變化如慢性化、重癥化甚至發(fā)生癌變的臨床關(guān)系，需要更大樣本的臨床資料進(jìn)一步來觀察。我們認(rèn)為，慢性乙型肝炎患者血清中任何HBV抗體的出現(xiàn)都提示并不意味HBV存在和復(fù)制的停止，在臨床上需要密切的動態(tài)觀察。
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